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MTT法和CCK-8法细胞活性检测及CCK-8试剂盒促销

 

MTT法细胞活性检测方法简介

MTT法------什么是MTT法?

MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、细胞增殖测定、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。MTT法的特点是灵敏度高、价格经济实惠。不过,MTT法是有缺陷的,是因为MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测。这不仅使检测时的工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。

点击查看>>> MTT法_互动百科

 

CCK-8法(或称WST-8法)细胞活性检测方法简介

CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。CCK-8法的优点: 1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂; 2、CCK-8法能快速检测; 3、CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度; 4、CCK-8法的重复性优于MTT法; 5、CCK-8法对细胞毒性小; 6、CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。  CCK-8法的缺点: 1、与MTT法相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。 2、CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。

 

CCK-8法和MTT法比较研究的文献参考

点击查看>>> CCK-8法和MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的最佳条件比较研究

参考文献摘要:以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,探讨了CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。CCK-8的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102-1×105个。在检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞的增殖影响实验中,发现CCK-8法测得数据的线性相关性优于MTT法,并且数据偏差较MTT法小。实验结果表明CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。

点击查看>>> MTT法和CCK-8法检测细胞活性之测试条件比较

参考文献摘要:利用HL60作为研究对象,对比了MTT法和CCK-8法在最佳检测时刻和检测波长等参数的差异。对于CCK-8法,最佳测试时刻在细胞液培养4 h后,最佳测试波长为490 nm。实验结果表明用CCK-8法检测的OD值与活细胞数的线性相关度要优于MTT法,是一种灵敏度较高、重复性好的的细胞活性检测方法。

全文下载:MTT法和CCK-8法比较研究之全文


CCK-8法和MTT法的区别

CCK-8法或称WST-8法

MTT法

1

还原后的Formazan是水溶性的
(不需要溶解)

还原后的Formazan是非水溶性的
(需要加有机溶剂溶解)

2

重现性好

由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Formazan,故有时重复性略差

3

操作简便

操作繁琐

4

测定波长:450~490nm

测定波长:550~600nm

5

为1瓶溶液,无需预制,即开即用

由于需要加有机溶剂溶解,工作量比较大


Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)产品订购信息

   品牌               货号                     产品名称                      包装规格          促销价格         货期
DOJINDO      CK04-500        Cell Counting Kit-8 试剂盒        500 Tests          998元           现货
DOJINDO      CK04-1000      Cell Counting Kit-8 试剂盒       1000 Tests         1668元          现货
DOJINDO      CK04-3000      Cell Counting Kit-8 试剂盒       3000 Tests          请询价          现货

上海华雅思创生物销售的Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)是从日本进口的,由日本Dojindo开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用Dojindo开发的水溶性四唑盐-WST-8,在日本、美国、欧洲等国家均持有专利和注册商标。上海华雅思创生物科技有限公司在上海仓库备有现货,并严格按照产品的最佳储存条件进行储存与管理,我们的一贯宗旨是:更用心地为中国广大科学研究工作者提供更安全、更放心、更便捷的服务。

CCK-8试剂盒图片

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CCK-8试剂盒的主要产品特性及应用

★ 操作简便,省时省力
★ 水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
★ 无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
★ 为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
★ 适合于高通量药物筛选

CCK-8的用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
CCK-8的使用:CCK-8试剂盒在中国中科院、北京大学、复旦大学、中山大学、四川大学、武汉大学等知名科研院所、三甲医院的中心实验室广泛应用,受到国际科研者的高度评价,使用CCK-8发表的文献达600多篇,其中截止2008年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,最高IF26.5分。

 

点击查看>>> 关于CCK-8法实验中遇到的问题和答案(网页的后半部分)

 

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