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支原体检测试剂盒

 

Mycoplasma支原体简介

中文名称:支原体;
英文名称:Mycoplasma;
名词定义:支原体(mycoplasma),又称霉形体,没有细胞壁的原核生物,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。它对许多抗生素具有抗性,如类胸膜肺炎微生物。
支原体的种类有:Mycoplasma arginin(精氨酸支原体)、Mycoplasma alkalescens(产碱支原体)、Mycoplasma pulmonis(肺支原体)、Mycoplasma hyosynoviae(猪滑液支原体)、Mycoplasma gateae(猫支原体)、Mycoplasma orale(口腔支原体)、Mycoplasma salivarium(唾液支原体)、Mycoplasma auris(耳支原体)、Mycoplasma cloacale(泄殖腔支原体)、Mycoplasma fermentans(发酵支原体)、Mycoplasma hyopneumoniae(猪肺炎支原体)、Mycoplasma primatum(类人猿支原体)、Mycoplasma edwardii(爱德华氏支原体)、Mycoplasma collis(希尔氏支原体)、Mycoplasma mobile(运动支原体)等。

如果您想详细了解有关支原体的形态结构、感染、诊断、培养和致病机理等,请点击查看>>> 支原体_百度百科

 

细胞培养中支原体污染问题

支原体污染常常被称为珍贵细胞系的“秘密入侵者”或“沉默的杀手”,它在许多实验室中很常见,是涉及哺乳动物细胞培养(请点击查看>>> Cell Biology/Cell Culture Protocols)的科学家面临的主要问题之一。由于支原体污染能影响几乎每一个细胞参数,所以很多研究都强调了常规筛选研究细胞系的需要,以确保观察到的结果不被污染所损害。

研究表明,支原体污染能耗尽营养物,促进代谢积累,导致pH改变,诱导或抑制细胞因子表达,并改变培养细胞的代谢、增殖特征及形态。支原体很难检测,因为细胞体积小,种类繁多,培养的混浊度以及对加富培养基的需求有限。此外,某些种类或菌株可能是细胞侵入性的。基于上述原因,开发一种针对支原体的快速可靠的支原体检测试剂盒颇具挑战性。

欧洲细胞库(ECACC)规定,“支原体污染比细菌和真菌污染更为隐蔽。支原体污染很难检测,需要使用专门技术。这些支原体检测应当成为常规和定期质量控制筛查步骤中的一部分。”美国国立卫生研究院(NIH)在一封关于细胞错误鉴定和交叉污染的公开信中,推荐实验室遵守细胞培养良好规范(GCCP)指南。这包括在实验室引入新细胞系时,需要建立对支原体进行检测的质量保证制度,接着才进行常规筛查,以确保它们无支原体污染。

点击查看>>> Why do mycoplasma contamination rates remain high?


支原体检测试剂盒------美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 检测原理

美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性,进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作,能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解,然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应,将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一个比率,该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在,第二次读数相对于第一次读数就没有增加;如果酶与底物进行特异性反应,就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到,其公式如下:

                                    Luciferase

ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP

                                      Mg 2+      + PPi + CO2 + LIGHT

这个反应的发生是在室温(18°C~22°C)进行的,也是荧光素酶反应的最佳温度。

在支原体检测试剂盒的检测原理中,最后通过分光光度计读数,由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系,因此可检测支原体的污染问题。

支原体检测试剂盒图片

Lonza支原体检测试剂盒的产品组分

华雅思创生物在中国代理销售的Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是从美国进口的,由著名的Lonza公司生产,产品质量稳定可靠,品牌影响力大,在全球生物医药和科学研究领域得到广泛的应用,例如罗氏制药、诺华制药、GSK、中科院上海生命科学研究院、复旦大学、中山大学等。该支原体检测试剂盒由反应试剂、检测缓冲液和底物3部分组成,详细清单如下:

LT07-218  支原体检测试剂盒 (Sufficient for 25 tests)
1. LT27-217 MycoAlert® Reagent. Lyophilized. 5 x 600 μl vials.
2. LT27-218 MycoAlert® Assay Buffer. 1 x 10 ml bottle.
3. LT27-221 MycoAlert® Substrate. Lyophilized 5 x 600 μl vials.

LT07-418 支原体检测试剂盒 (Sufficient for 50 tests).
1. LT27-237 MycoAlert® Reagent. Lyophilized. 2 x 2.5 ml vials.
2. LT27-218 MycoAlert® Assay Buffer. 1 x 10 ml bottle.
3. LT27-238 MycoAlert® Substrate. Lyophilized. 2 x 2.5 ml vials.

LT07-318 支原体检测试剂盒
 (Sufficient for 100 tests)
1. LT27-216 MycoAlert® Reagent. Lyophilized. 1 x 10 ml vial.
2. LT27-220 MycoAlert® Assay Buffer. 1 x 20 ml bottle.
3. LT27-224 MycoAlert® Substrate. Lyophilized 1 x 10 ml vial.


Lonza支原体检测试剂盒的产品特征

Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是专门检测细胞培养过程中是否被支原体污染的经典试剂盒,它包含检测所用到的各种试剂和产品操作手册。该支原体检测试剂盒具有操作简单、快速高效、结果稳定可靠、灵敏度极高等优点,让您在支原体检测时轻松容易,并确保您的培养洁净无污染。该支原体检测试剂盒的主要特征如下:

Fast--------------20分钟内即可诊断出你的细胞培养是否健康无污染,而其它方法一般要几个小时到一周的时间。
Convenient---只需把你的细胞培养物与两种试剂混合配成100ul,在分光光度计上读2次数。
Universal------可以检测所有支原体和无胆甾原体在常规细胞培养过程中的污染。
Sensitive------可检测<50 cfu/ml的支原体,避免出现像PCR和荧光染色方法出现的阴性结果。
Complete-----该支原体检测试剂盒包含实验所需的所有试剂,而不像商业PCR检测方法中需要你提供PCR酶、核酸、限制性内切酶和琼脂糖电泳所需的其它试剂。

Lonza支原体检测试剂盒的订购信息

   品牌         货号                          产品名称                 包装规格    价格
LONZA     LT07-118     MycoAlert® 支原体检测试剂盒      10 Tests    请询价
LONZA     LT07-218     MycoAlert® 支原体检测试剂盒      25 Tests    请询价
LONZA     LT07-418     MycoAlert® 支原体检测试剂盒      50 Tests    请询价
LONZA     LT07-318     MycoAlert® 支原体检测试剂盒     100 Tests   请询价
LONZA     LT07-518     MycoAlert Assay Control              10 Tests    请询价

与Lonza支原体检测试剂盒相关的产品信息
 品牌           货号                  产品名称
LONZA     LT07-918     MycoZap 5 Treatment Kit
LONZA     LT07-818     MycoZap 1 Treatment Kit
LONZA     AAL-1001    Lucetta™ Luminometer

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